زمینه و هدف: وزیکولهای غشاء خارجی باکتریها نقش مهمی در فیزیولوژی، بیماری زایی و تعامل بین میزبان و عامل بیماریزا دارند. این وزیکولها به باکتری اجازه می دهند تا آنزیمها و محتویات خود را به شکل محافظت شده منتقل کنند و در زنده ماندن باکتری نقش دارند. از آنجایی که آنها به عنوان نماینده باکتری محسوب می شوند، مطالعه آنها به شناخت بیشتر باکتریها و تعامل آنها با محیط کمک میکند. از این رو روشهای جداسازی این وزیکولها اهمیت ویژهای دارد. لذا، هدف از این پژوهش، معرفی روشی نوین برای جداسازی وزیکولهای غشاء خارجی باکتری اشرشیاکلی است.
روش کار: در روش شناسی حاضر، باکتری اشرشیاکلی انتروتوکسیژنیک در شرایط استاندارد کشت داده شد. سپس مایع رویی کشت جدا گردید و از فیلتراسیون با جریان مماسی برای تغلیظ وزیکولها و سانتریفیوژ دور بالا برای رسوبدهی آنها استفاده شد. وزیکولهای جدا شده توسط میکروسکوپ الکترونی عبوری تایید و وزن مولکولی و میزان غلظت پروتئینی مشخص گردید.
یافتهها: ریخت شناسی وزیکولها توسط میکروسکوپ الکترونی تایید و اندازه آنها بین 50 تا 100 نانومتر تعیین شد. الگوی الکتروفورتیک نشان دهنده باندهای قوی و ضعیف در ناحیه بین 41-22 کیلودالتون بوده و غلظت پروتئین وزیکولهای تخلیص شده 542 میکروگرم مشخص گردید.
نتیجهگیری: نتایج به دست آمده نشان میدهد که در نتیجه استفاده از روش ارائه شده در این مطالعه علاوه بر ارائه محصولی همسان، از بعد اقتصادی و زمانی نسبت به روشهای رایج مزایای مثبتی دارد و میتواند زمینه ساز جداسازی این وزیکولها در سطح صنعتی نیز باشد.
بازنشر اطلاعات | |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |