مجله علوم پزشکی رازی

    زمینه و هدف: فاسیولیازیس، یکی از بیماری‌های مهم انگلی انسان و دام است که توسط گونه‌های فاسیولا در میزبان ایجاد می‌شود. تقریباً 4/2 میلیون نفر در جهان به این انگل مبتلا هستند و 180 میلیون نفر، در معرض خطر ابتلا هستند. تشخیص بموقع و درمان سریع آن، از بروز عوارض بیماری در مبتلایان بطور چشمگیری جلوگیری می‌نماید. به همین جهت در مطالعه حاضر نسبت به جداسازی، خالص‌سازی و ارزیابی آنتی‌ژن مناسب و بکارگیری آن در روشهای سرولوژیک حساس و اختصاصی اقدام شد. روش بررسی: در این مطالعــه، ابتدا کرمهای سالم جمع‌آوری شدند، سپس کوتیکول و سایر ارگان‌های آنها تفکیک شده، آنگاه به صورت جداگانه، هموژنیزه وسونیکه شدند. میزان پروتئین آنها به روش برادفورد اندازه‌گیری شده و کلیه نمونه‌ها، تغلیظ شدند و بر روی ستــون ژل کروماتوگرافی(سفادکس G200) بــرده شدنــد. برای هر قسمت، 4 جزء آنتی‌ژنیک دریافت شد. آنگاه با اولترافیلتراسیــون پروتئیــن، نمونه‌ها به میــزان مناسب رسانــده شدنــد. با آنتی‌ژن بدست آمده، 36 راس خرگوش مصون شدند، آنتی سرم بدست آمده از خرگوش‌ها به همراه 30 نمونه سرم انسان مشکوک به ابتلاء به فاسیولیازیس، به روش CIEP(Counterimmuno-electrophoresis) آزمایش شدند. در این مطالعه، آنتی‌ژن جزء 2(Fraction 2) کوتیکول فاسیولا هپاتیکا، حساسیــت 9/90% و اختصاصیــت 4/94% را در تســت CIEP نشــان داد. آنگاه آنتی‌ژن مذکور با روش SDS-PAGE(sodium dodecyl sulphate-polyacryl amide) شناسایی شد که تنها یک باند مشخص 60 کیلودالتونی داشت؛ در طول ژل، باند دیگری مشخص نگردید؛ این آنتی‌ژن، با روش الایزا مورد آزمایش قرار گرفت. در این روش، آنتی‌بادی در نمونه سرم 26 نفر از 30 انسان و همه 36 راس خرگوش، قابل تشخیص و اندازه‌گیری بود. نوع مطالعه، راه‌اندازی یک روش یا سیستم علمی بود که تجزیه و تحلیل اطلاعات آن با استفاده از آزمون همبستگی به روشspss انجام شد. یافته‌ها: در مجموع با روش CIEP، از مجموع 66 نمونه سرم(30 نمونه سرم انسان و 36 نمونه سرم خرگوش)، در 60 مورد (آنتی‌ژن حاصل از کوتیکول فاسیولا هپاتیکا) واکنش رسوبی مثبت مشاهده گردید، در حالی که با روش الایزا، 62 نمونه سرم از 66 نمونه، جواب مثبت داشته است. نتیجه‌گیری: بنابراین استفاده از آنتی‌ژن 60 کیلودالتونی کوتیکول کرم فاسیولا به عنوان آنتی‌ژن خالص، در تستهای سرولوژیک CIEP والایزا توصیه می‌شود. نتایج حاصل، بیانگر حساسیت بالای روش الایزا نسبت به روش CIEP می‌باشد.