iumssj
جلد 26، شماره 10 - ( 10-1398 )                   جلد 26 شماره 10 صفحات 0-0 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Aalizade R, Kardan N, Khodakarami A, Dabirmanesh B, Khajeh K. Cloning, expression and Characterization of Carboxypeptidase G2 Enzyme from E.coli. RJMS. 2019; 26 (10)
URL: http://rjms.iums.ac.ir/article-1-5093-fa.html
عالی زاده رضا، کاردان نسرین، خداکرمی عاطفه، دبیرمنش بهاره، خواجه خسرو. کلون، بیان، تخلیص و تعیین خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم کربوکسی پپتیداز G2. مجله علوم پزشکی رازی. 1398; 26 (10)

URL: http://rjms.iums.ac.ir/article-1-5093-fa.html


دانشگاه تربیت مدرس ، dabirmanesh@modares.ac.ir
چکیده:   (183 مشاهده)
زمینه و هدف : متوتروکسات یکی از داروهای پر مصرف در شیمی درمانی است که نارسایی کلیوی یکی از عوارض جانبی آن است. آنزیم کربوکسی پپتیداز (گلوکارپیداز) آنزیمی باکتریایی است که می­تواند متوتروکسات را به متابولیت­های غیرفعال خود تبدیل کند و پس از درمان با دوز بالای متوتروکسات منجر به حذف متوتروکسات از مسیر غیرکلیوی را فراهم می­کند. گلوکارپیداز تحت نام تجاری وراکساز به بازار عرضه می­گردد.
روش کار : در این پروژه ابتدا ژن کربوکسی پپتیداز G2  در داخل وکتور pUC57 سنتتز گردید. سپس به داخل وکتور pET28a ساب کلونینگ گردید و بین دو سایت برش NdeI  و XhoI  قرار گرفت. پلازمید نوترکیب به داخل سویه بیانی E. coli BL21 ترنسفورم شد و تحت شرایط بیانی مختلف بیان گردید.
یافته ها : بیشترین سطح بین در غلظت 5/0 میلی مولار IPTG دمای 25 درجه سانتیگراد و مدت زمان انکوباسیون 6 ساعت تعیین شد. در انتها پروتئین مورد نظر از طریق کروماتوگرافی تمایلی نیکل آگارز تخلیص و ویژگی های سینتیکی آن بررسی شد. pH و دمای بهینه فعالیت آنزیم به ترتیب 7 و C˚25 به دست آمد. برای سوبسترای متوتروکسات  μM 24 Km=  و  μmol/min  005431/0 Vmax =   محاسبه شد.
نتیجه گیری : این مطالعه به منظور تولید و فرآوری آنزیم کربوکسی پپتیداز G2 بوده و در آینده این آنزیم به عنوان یک کاندیدای مهم برای کاهش اثرات جانبی شیمی درمانی می باشد. 
     
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوشیمی بالینی

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA

ارسال پیام به نویسنده مسئول


کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله علوم پزشکی رازی می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2020 All Rights Reserved | Razi Journal of Medical Sciences

Designed & Developed by : Yektaweb