جلد 25، شماره 11 - ( 11-1397 )                   جلد 25 شماره 11 صفحات 52-60 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

abdollahi M, Honari H, e'temad aubi S M. Expression of SO6-STxB gene cassette in Escherichia coli and investigation of antibody titer. RJMS. 2019; 25 (11) :52-60
URL: http://rjms.iums.ac.ir/article-1-5164-fa.html
عبدالهی مسعود، هنری حسین، اعتمادایوبی سید مسیح. بیان کاست ژنی SO6-STxB در باکتری اشرشیا کلی و بررسی تیترآنتی‌بادی. مجله علوم پزشکی رازی. 1397; 25 (11) :52-60

URL: http://rjms.iums.ac.ir/article-1-5164-fa.html


دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایران ، honari.hosein@gmail.com
چکیده:   (156 مشاهده)
زمینه و هدف: یکی از راه­های تقویت اثر واکسن­ها استفاده از یاور­ها می­باشد. STxB باکتری شیگلا دارای نقش یاوری و حاملی بوده و می­توان با ترکیب کردن آنتی­ژن­های کاندیدای واکسن با این یاور به تولید واکسن مناسب پرداخت. غاسول صابونی گیاهی دارای فعالیت ان-گلیکوزیداز می­باشد. ایزوفرم 6 این گیاه (SO6)، آدنین 4324 را در توالی حفاظت شده GAGA در 28SrRNA پورین­زدایی کرده و سنتز پروتئین را مختل می­کند. هدف این مطالعه، بیان ژن SO6-STxB در باکتری اشرشیا کلی و بررسی تیتر آنتی‌بادی آن در موش می­باشد.
روش کار: در این مطالعه تجربی ژن SO6 با جایگاه­های آنزیمی BamHI و SalI از پلاسمید pUC57 جداسازی گردید و در وکتور بیانی pET28a(+) حاوی ژن STxB زیرهمسانه­سازی و به باکتری اشرشیا کلی سویه BL21(DE3) تراریخت شد. بیان پروتئین نوترکیب SO6-STxB توسط IPTG القا و تخلیص به وسیله کروماتوگرافی تمایلی ستون نیکل انجام گردید. تأیید پروتئین نوترکیب با استفاده از وسترن بلات انجام گرفت. موش­‌ها به صورت صفاقی با پروتئین تخلیص شده واکسینه شدند و تیتر IgG سرم به روش ELISA مورد سنجش قرار گرفت.
یافته­ها: زیرهمسانه­سازی ژن STxB-SO6 در­­ وکتور بیانی pET28a(+) به‌وسیله واکنش PCR و هضم آنزیمی، تائید شد. پروتئین نوترکیب 5/37 کیلودالتونی تولید شده به وسیله SDS-PAGE و لکه­گذاری وسترن تأیید شد. سپس آنتی­بادی تولید شده از سرم موش جداسازی و توسط الایزا اندازه‌گیری گردید.
نتیجه­گیری: آنتی­ژن STxB-SO6 نوترکیب تخلیص شده می­تواند برای تحقیقات ضد سرطانی و کاندید واکسن استفاده شود.
واژه‌های کلیدی: STxB، شیگلا، غاسول صابونی، فعالیت N-glycosidase، SO6
متن کامل [PDF 1297 kb]   (19 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیولوژی (زیست شناسی)

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA code

ارسال پیام به نویسنده مسئول


کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله علوم پزشکی رازی می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2019 All Rights Reserved | Razi Journal of Medical Sciences

Designed & Developed by : Yektaweb