iumssj
جلد 20، شماره 113 - ( 8-1392 )                   جلد 20 شماره 113 صفحات 60-67 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Fatahi Abdizadeh M, Makvandy M, Samarbafzadeh A, Latifnia M, Azadmanesh K. Construction of an inducible luciferase reporter vector for detection of HTLV-1 virus activity. RJMS. 2013; 20 (113) :60-67
URL: http://rjms.iums.ac.ir/article-1-2782-fa.html
فتاحی عبدی زاده مجتبی، مکوندی منوچهر، سمر باف زاده علیرضا، لطیف نیا مریم، آزادمنش کیهان. ساخت وکتور ریپورتر القایی لوسیفراز برای ردیابی فعالیت ویروس HTLV-1. مجله علوم پزشکی رازی. 1392; 20 (113) :60-67

URL: http://rjms.iums.ac.ir/article-1-2782-fa.html


دانشگاه جندی شاپور علوم پزشکی اهواز
چکیده:   (4493 مشاهده)
 

زمینه و هدف: ویروس HTLV-1 ((Human T_cell lymphotropic virus type با حدود 20 میلیون نفر آلوده در جهان یک مشکل بهداشت جهانی است که در مناطقی مثل ژاپن و خراسان ایران اندمیک است. این ویروس عامل بیماری پیشرونده لوسمی سلول های T بزرگسالان (ATL) می‌باشد که دارویی تائید شده موثر بر علیه آن تاکنون وجود ندارد. به دلیل خصوصیات غیر سیتولیتیکی و انتقال سلول به سلول این ویروس، مطالعات دارویی در کشت سلولی بر روی این ویروس با روش های معمول در آزمایشگاه In vitro )) کم بوده و منحصر به چند رده سلولی آلوده به آن می‌باشد .بنابراین ساخت وکتور ریپورتر برای ارزیابی عفونت ویروس HTLV1 در کشت سلولی به جهت مطالعات دارویی ضروری به نظر می رسد. ریپورتر های ساخته شده برای رتروویروس ها معمولاً بر اساس ترانس اکتیویشن ناحیه LTR می باشد. ناحیه LTR در ژنوم ویروس شامل پروموترویروس است که در تکثیرو نسخه برداری آن، تحت تاثیر پروتئین ویروسی Tax نقش دارد.

 

روش کار: منطقه پروموتری LTR ویروس با استفاده از آنزیم محدود کننده از پلاسمید pUCLTR-Lacz بریده و در وکتور بدون پروموتر pGL4.17 که حامل ژن ریپورتر لوسیفراز است در بالادست ژن لوسیفرازساب کلون شد. ابتدا کلونینگ با colony PCR، هضم آنزیمی وتعیین توالی تایید شد. سپس سلول T293 باوکتور نوترکیب ترانسفکت شد وبیان القایی لوسیفراز مورد تایید قرار گرفت.

 

یافته‌ها: وکتور نوترکیب تولید شده درسلول T293 پس از کوترانسفکت با وکتور بیانیTax باعث بیان قابل ملاحظه ی لوسیفراز تا 50 برابر درسلول‌های مورد آزمایش نسبت به کنترل شد.

 

نتیجه‌گیری: با توجه به قابلیت بالای وکتور نوترکیب تولید شده، می تواند درمطالعات بعدی درساخت رده سلولی نشانگر برای ویروس HTLV-1، به جهت مطالعات پایه ای و دارویی به کار رود.

 
واژه‌های کلیدی: لوسیفراز، وکتور ریپورتر، HTLV-1.
متن کامل [PDF 567 kb]   (1720 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: میکروبیولوژی

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله علوم پزشکی رازی می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2019 All Rights Reserved | Razi Journal of Medical Sciences

Designed & Developed by : Yektaweb