fa بررسی میزان بیان ژن آنزیم 15-لیپواکسیژناز-1 و متابولیت آن( 15-S-HETE) در بیماران مبتلا به مالتیپل اسکلروزیس و ارتباط آن با پروفایل لیپیدی سرم بیوشیمی بالینی Clinical Biochemistry پژوهشي Research <strong>زمینه و هدف:</strong> بیماری مالتیپل اسکلروزیس از شایع‌ترین بیماری‌های التهابی خودایمن در سنین جوانی است که بسیاری از جوانب این بیماری هنوز ناشناخته است. هدف مطالعه حاضر بررسی بیان و فعالیت آنزیم 15-لیپواکسیژناز ( تولید کننده محصولات پراکسیدی لیپیدی و تنظیم کننده التهاب و واکنش های ایمنی) در سلول های تک هسته ای خون محیطی بیماران مبتلا به مالیپل اسکلروزیس و افراد سالم &nbsp;و بررسی ارتباط آن با پروفایل لیپیدی افراد است.<br> <strong>روش‌کار</strong>: در این مطالعه موردی &ndash; شاهدی ، 30 بیمار مبتلا به مالتیپل اسکلروزیس مراجعه کننده به بیمارستان فیروزگر تهران و 23 نفر سالم به عنوان گروه کنترل شرکت داشتند. از سلول های تک هسته ای خون محیطی افراد جهت استخراج<span dir="LTR">&nbsp; mRNA </span>و ساخت<span dir="LTR"> cDNA </span>استفاده شد و جهت تعیین میزان بیان ژن از روش<span dir="LTR">&nbsp;&nbsp; Real Time PCR</span>بر پایه سایبرگرین استفاده شد. آنالیز نتایج با استفاده از متد <span dir="LTR">&Delta;&Delta;CT</span>&nbsp; بررسی گردید.&nbsp; &nbsp;هم‌چنین میزان متابولیت آنزیمی 15 -لیپواکسیژناز <span dir="LTR">(15-S-HETE)</span> در سرم افراد توسط تکنیک‌های کروماتوگرافی مایع با فشار بالا<span dir="LTR"> (HPLC) </span>مورد ارزیابی قرار گرفت. در نهایت آنالیز آماری به وسیله نسخه 5 نرم افزار<span dir="LTR"> Graph Pad Prism </span>&nbsp;و تست آماری <span dir="LTR">T</span><span dir="LTR">-Test</span>استفاده گردید.<br> <strong>یافته‌ها</strong>: بررسی میزان بیان ژن 15 لیپواکسیژناز - 1 در سلول های تک هسته ای جدا شده از خون محیطی افراد مبتلا به مالتیپل اسکلروزیس و افراد سالم نشان داد که میزان بیان این ژن در نمونه های بیمار افزایش معنی داری را در مقایسه با افراد سالم نشان می دهد. همچنین میزان فعالیت آنزیم 15 لیپواکسیژناز - 1 که از طریق اندازه گیری میزان متابولیت آن در سرم بیماران و افراد سالم بررسی گردیده است نشان داد که فعالیت آنریم در سرم بیماران بیشتر از افراد سالم است (<span dir="LTR">p<0.05</span>). همچنین نتایج مطالعه حاضر نشان می دهد که در افراد مبتلا به مالتیپل اسکلروزیس که سطح کلسترول ، تری گلیسیرید و <span dir="LTR">LDL</span> بالاتر از محدوده نرمال دارند، میزان بیان آنزیم 15 لیپواکسیژناز - 1 و متابولیت آن <span dir="LTR">(15-S-HETE)</span> افزایش معنی داری را نسبت به افراد بیمار با پروفیل لیپیدی نرمال نشان می دهد.<br> <strong>نتیجه‌گیری</strong>: نتایج حاصل از این تحقیق نشان می‌دهد که مسیر آنزیمی 15 لیپواکسیژناز - 1 ممکن است&nbsp; در بیماری زایی&nbsp; مالتیپل اسکروزیس موثر باشد و با توجه به اختلاف معنی دار سطح آنزیم فوق در نمونه های بیماران و افراد سالم می تواند به عنوان مسیر احتمالی موثر در کنترل بیماری مورد توجه و بررسی بیشتر قرار گیرد. از آنجا که افزایش سطح پروفیل لیپیدی از علل خطر و تاثیر گذار در بیماریزایی مالتیپل اسکروزیس است در این مطالعه نیز ارتباط مستقیمی بین سطح وفعالیت بیشتر آنزیم در بیماران با سطح کلسترول ، تری گلیسیرید و <span dir="LTR">LDL</span> بالاتر مشاهده گردید که به نقش مهم مسیر های مرتبط با متابولیسم چربی در مالتیپل اسکروزیس تاکید دارد.<br> &nbsp; <strong>Background and aim</strong>: Multiple sclerosis is one of the most common autoimmune inflammatory diseases in young ages. Many aspects of this disease are still unknown. The aim of the present study was to investigate the expression and activity level of 15-lipoxygenase-1 (a producer of lipid peroxide and regulating inflammation and immune responses) in peripheral blood mononuclear cells in patients with multiple sclerosis and healthy individual and considering its correlation with lipid profile of individuals.<br> <strong>Materials and Methods</strong>: 30 patients of Firouzgar Hospital in Tehran with multiple sclerosis and 23 healthy subjects as control group have participated &nbsp;in &nbsp;this case-control study. The peripheral blood mononuclear cells of the subjects were used for mRNA extraction and cDNA construction, and to determine the expression level of 15-LOX-1 gene, a Real-Time PCR-based&nbsp; <a href="https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwiJ3sfZ06fWAhXnQZoKHTA0Ae0QFggxMAE&url=https%3A%2F%2Fwww.aatbio.com%2Fproducts%2Fcyber-green-sybr-green-10-000x-aqueous-pcr-solution&usg=AFQjCNHGhYaNew-HwUjgfQ6Y4Of-nBZthQ">Cyber Green</a> method was used and data were analyzed using &Delta;&Delta;CT method. Also, the amount of 15-lipoxygenase-1 product (15-S-HETE) in serum was determined by high pressure liquid chromatography (HPLC). Finally, statistical analysis was performed using Graph Pad Prism software version 5 and independent t-test<span dir="RTL">.</span><br> <strong>Results</strong>: Measurement of 15-lipoxygenase-1 expression level in mononuclear blood cells extracted from the peripheral blood of patients with multiple sclerosis and healthy controls revealed that the level of this gene was significantly increased in patients comparing to controls. Also, the activity of 15-lipoxygenase-1 which was measured via its metabolite level in serum of patients and controls demonstrated that the enzyme activity was increased in serum of patients comparing to controls (p <0.05). Also, the results have shown that in patients with higher level of Cholesterol, Triglyceride and LDL, the level of 15-lipoxygensae-1 and its metabolite had higher level comparing to patients with normal lipid profile.<br> <strong>Conclusion</strong>: The results of the current study have shown that the 15-lipoxygenase-1 enzymatic pathway might affect Multiple Sclerosis pathogenesis and due to the significant differences of the enzyme level in patients comparing to controls, it can be noticed as a possible pathway for controlling disease. Since elevated lipid profile level is the risk factor of Multiple Sclerosis pathogenesis, in this study the correlation was observed between the higher level of LDL, Cholesterol and Triglyceride and enzyme expression level and activity which emphasize on the important role of lipid metabolic pathway in Multiple Sclerosis. التهاب, HPLC, بیان ژن, آنزیم 15-لیپواکسیژناز, مالتیپل اسکلروزیس Inflammation, HPLC, gene expression, 15-lipoxygenase enzyme, multiple sclerosis 54 64 http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3738-1&slc_lang=fa&sid=1 Banafsheh Safizadeh بنفشه صفی زاده bsafizadeh@yahoo.com 3900319475328460037858 3900319475328460037858 No Birjand University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی بیرجند Reyhane Hoshyar ریحانه هوشیار reyhaneh.houshyar@gmail.com 3900319475328460037859 3900319475328460037859 No Birjand University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی بیرجند Masoud Mehrpour مسعود مهرپور mehrpr@yahoo.com 3900319475328460037860 3900319475328460037860 No Iran University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی ایران Bita Bijari بیتا بیجاری bita.bijari@yahoo.com 3900319475328460037861 3900319475328460037861 No Birjand University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی بیرجند Alireza Sheikhi علیرضا شیخی Alireza.sheikhi71@yahoo.com 3900319475328460037862 3900319475328460037862 No Iran University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی ایران Masoumeh Tavakoli-Yaraki معصومه توکلی یرکی masoumeh.tavakoli@gmail.com 3900319475328460037863 3900319475328460037863 Yes Iran University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی ایران