fa روش ساده و کم هزینه جهت جداسازی مونوسیت ها ایمنی‌شناسی Immunology پژوهشي Research <p dir="RTL"><strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف</span></span></strong>: <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مونوسیت‌ها یکی از اجزای مهم سیستم ایمنی هستند که در پاسخ‌های التهابی و پاسخ های ایمنی ذاتی نقش مهمی ایفا می‌کنند؛ بنابراین جداسازی این سلول‌ها در تحقیقات ایمنی شناسی دارای اهمیت فراوان بوده و به همین دلیل روش‌های مختلفی برای جداسازی این سلول‌ها ابداع شده است. یکی از کم هزینه‌ترین و آسان‌ترین روش‌ها جداسازی با استفاده از خاصیت چسبندگی این سلول‌ها است که در این مطالعه مورد بررسی قرار گرفته است.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">روش کار</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">: در این روش بعد از جداسازی سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی، با استفاده از خاصیت چسبندگی مونوسیت‌ها به سطح پلاستیکی این سلول‌ها از سوسپانسیون سلولی جدا سازی شدند و سپس با استفاده از آنتی‌بادی‌های اختصاصی نشاندار با رنگ فلورسنت (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PE</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">FITC</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) متصل شونده به مارکرهای اختصاصی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD11b</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD14</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بر سطح مونوسیت‌ها رنگ آمیزی گردید و درصد خلوص سلول‌های جداسازی شده مشخص شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">: پس از جدا سازی مونوسیت‌ها و بررسی آن‌ها با دستگاه فلوسایتومتری نتایج بیانگر این موضوع بود که 2/90 درصد از سلول‌های جداشده دو مارکر </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD11b</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD14</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> را بیان می‌کردند</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">.</span></span></span><strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">: گرچه روش‌های جداسازی مختلفی برای مونوسیت‌ها وجود دارد اما هرکدام دارای مزیت‌ها و معایبی هستند. یکی از آسان‌ترین و کم‌هزینه‌ترین این روش‌ها جداسازی براساس خاصیت چسبندگی این سلول‌ها است که امکان جداسازی این سلول‌ها با درصد خلوص بالا را فراهم می‌کند.</span></span><br> &nbsp;<br> &nbsp;</p> <p dir="RTL"></p> <p><strong>Abstract&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; </strong></p> <p><strong>Background:</strong> Monocytes are a key component of the immune system, which play an important role in inflammatory and innate immune responses. So the isolation of these cells is important in immunology researches and accordingly many methods have been developed for the monocyte isolation. One of the least expensive and simple separation methods is using the <em>ability of these cells</em>&nbsp;to adhere to solid&nbsp;<em>surfaces</em> that were examined in this study.</p> <p><strong>Methods</strong><strong><span dir="RTL">:</span></strong> In this way, after the isolation of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), monocytes were isolated from cell suspension by using the adhesion ability of these cells to the plastic surface<span dir="RTL">.</span>Isolated monocytes were stained by using specific antibodies labeled with fluorescent dyes (PE, FITC) binding to specific markers on the surface of monocytes CD11b and CD14 and the purity of cells were characterized by flow cytometry.</p> <p><strong>Results</strong><strong><span dir="RTL">:</span></strong> Flow cytometry results after separation of monocytes shown that 90.2% of cells were expressed two markers CD11b and CD14.</p> <p><strong>Conclusion:</strong> Although there are several monocyte isolation methods, each of them have advantages and disadvantages. One of the least expensive and Simple method of isolation is using adhesion ability of these cells that provides possibility of monocyte isolation with high purity.</p> واژگان کلیدی: مونوسیت,جداسازی,خاصیت چسبندگی Keywords:Monocyte, Isolation, Adhesion ability 30 34 http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3446-1&slc_lang=fa&sid=1 Negar Meratian Isfahani نگار مرآتیان اصفهانی nmeratian@gmail.com 3900319475328460038756 3900319475328460038756 No Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran. دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران. nafiseh Esmaeil نفیسه اسمعیل nafesm5@gmail.com 3900319475328460038755 3900319475328460038755 Yes Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran. دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران. Abbas Rezaei عباس رضایی rezaei@mui.ac.ir 3900319475328460038757 3900319475328460038757 No Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran. دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران. Ferdous Mehrabian فردوس محرابیان Mehrabian@med.mui.ac.ir 3900319475328460038758 3900319475328460038758 No Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran. دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران. Vida Homayouni ویدا همایونی vidahomayouni20@yahoo.com 3900319475328460038760 3900319475328460038760 No Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran. دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران. Mazdak Ganjalikhani Hakemi مزدک گنجعلی خانی حاکمی mghakemi@med.mui.Ac.ir 3900319475328460038759 3900319475328460038759 No Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran. دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.