fa کلونینگ و بیان ژن MOMP217 کلامیدیا تراکوماتیس در اشرشیا کولی میکروبیولوژی Microbiology پژوهشي Research <font face="Times New Roman" size="3">&nbsp;</font> <p class="MsoNormal" dir="rtl" style="margin: 0cm 0cm 0pt text-align: justify line-height: normal text-indent: 0.2pt unicode-bidi: embed direction: rtl text-justify: kashida text-kashida: 0%"><b><span lang=&quot;AR-SA&quot; style=&quot;font-family: &quot; b=&quot;&quot; mitra&quot;=&quot;&quot; font-size:=&quot;&quot; 10pt=&quot;&quot; mso-ansi-font-size:=&quot;&quot; 9.0pt=&quot;&quot; mso-ascii-font-family:=&quot;&quot; &quot;times=&quot;&quot; new=&quot;&quot; roman&quot;=&quot;&quot; mso-hansi-font-family:=&quot;&quot; roman&quot;&quot;=&quot;&quot;>زمینه و هدف: </b><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times="">کلامیدیا تراکوماتیس باکتری خاموش، مواج و متاسفانه فراموش شده ای است که باعث آسیب و اختلال در عملکرد دستگاه تناسلی می‌باشد. این باکتری گرم منفی و داخل سلولی اجباری با چرخه ی زندگی منحصر به خود و ایمنوپاتوژنز ویژه منجر به عوارض شدید من جمله اندومتریت، بیماری التهابی لگن </span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span 10.0pt="" 9pt="" b="" dir="ltr" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span>(PID)</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> و ناباروری می‌شود. این باکتری عامل تسهیل کننده ی انتقال ویروس نقص ایمنی انسانی </span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span 10.0pt="" 9pt="" b="" dir="ltr" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span>(HIV)</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> و همچنین کوفاکتور ویروس پاپیلومای القاء کننده‌ی نئوپلازی دهانه‌ی رحم است. برای غلبه بر این ناهنجاری ها واکسیناسیون بهترین راه برای کنترل عفونت است. بر این اساس پروتئین اصلی غشاء خارجی </span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span 10.0pt="" 9pt="" b="" dir="ltr" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span>(MOMP)</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> به عنوان کاندیدای بالقوه‌ی واکسن مطرح می‌باشد.</span></p> <font face="Times New Roman" size="3">&nbsp;</font> <p class="MsoNormal" dir="rtl" style="margin: 0cm 0cm 0pt text-align: justify line-height: normal text-indent: 0.2pt unicode-bidi: embed direction: rtl text-justify: kashida text-kashida: 0%"><b><span 10pt="" 9.0pt="" b="" calibri="" fa="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times="">روش کار</span></b><span 10pt="" 9.0pt="" b="" calibri="" fa="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times="">: در این مطالعه ژن </span><span 10.0pt="" 9pt="" b="" calibri="" dir="ltr" fa="" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" new="" style="font-family: " times="">MOMP217</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" calibri="" fa="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> در وکتور بیانی</span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span>^{<span 10.0pt="" 9pt="" b="" calibri="" dir="ltr" fa="" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span>+</span>}<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" calibri="" fa="" font-size:="" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> </span><a href="https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=3&cad=rja&uact=8&ved=0CCgQFjAC&url=https%3A%2F%2Fwww.addgene.org%2Fvector-database%2F2566%2F&ei=4dYkVenHOoa4ygOvoIHAAg&usg=AFQjCNHuj_W0qUBqFbv_0ffuP5BjNxUrfQ&bvm=bv.90237346,d.d2s"><span 10.0pt="" 9pt="" b="" calibri="" dir="ltr" fa="" font-size:="" minor-latin="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" new="" none="" style="color: windowtext font-family: " text-decoration:="" text-underline:="" times=""><u>pET-28b</u></span></a><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" calibri="" fa="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> کلون و در باکتری </span><span 10.0pt="" 9pt="" b="" calibri="" dir="ltr" fa="" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" new="" style="font-family: " times="">E.coli</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" calibri="" fa="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> بیان شد. بیان پروتئین با ژل </span><span 10.0pt="" 9pt="" b="" calibri="" dir="ltr" fa="" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" new="" style="font-family: " times="">SDS-PAGE</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" calibri="" fa="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-fareast-font-family:="" mso-fareast-theme-font:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> 10% رنگ شده با رنگ کوماسی بلو تایید شد.<b></b></span></p> <font face="Times New Roman" size="3">&nbsp;</font> <p class="MsoNormal" dir="rtl" style="margin: 0cm 0cm 0pt text-align: justify line-height: normal text-indent: -1.6pt unicode-bidi: embed direction: rtl text-justify: kashida text-kashida: 0%"><b><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times="">یافته‌ها: </span></b><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times="">در کنار مطالعات </span><span 10.0pt="" 9pt="" b="" dir="ltr" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" new="" style="font-family: " times="">In silico</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>، به دلیل وجود مناطق مهم اپی‌توپیک در این قطعه ژنی محافظت شده، </span><span 10.0pt="" 9pt="" b="" dir="ltr" font-size:="" mso-bidi-font-family:="" mso-bidi-font-size:="" mso-bidi-language:="" new="" style="font-family: " times="">MOMP217</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> نوترکیب می‌تواند پپتید مناسبی برای ایجاد ایمنی زایی معرفی گردد.</span></p> <font face="Times New Roman" size="3">&nbsp;</font> <p class="MsoNormal" dir="rtl" style="margin: 0cm 0cm 0pt text-align: justify line-height: normal text-indent: -1.6pt unicode-bidi: embed direction: rtl text-justify: kashida text-kashida: 0%"><b><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times="">نتیجه گیری:</span></b><span 10pt="" 9.0pt="" b="" font-size:="" lang="FA" mso-ansi-font-size:="" mso-ascii-font-family:="" mso-bidi-language:="" mso-hansi-font-family:="" new="" style="font-family: " times=""> با استفاده از تست های تاییدی بیشتر و مطالعات حیوانی به منظور بررسی و ارزیابی وضعیت پاسخ سیستم ایمنی، این پروتئین می‌تواند به عنوان کاندیدی برای مطالعات واکسنی مطرح شود. قطعا مطالعه‌ی پیش رو نیازمند انجام آزمایشات و تست های تکمیلی بیشتری می‌باشد.</span></p> <font face="Times New Roman" size="3">&nbsp;</font> Background: Chlamydia trachomatis is a silent, turbulent and unfortunately neglected bacterium which impairs human genital tract function. This Gram-negative obligate intracellular bacterium with unique life cycle and immunopathogenesis result in serious complications, such as Endometritis, pelvic inflammatory disease (PID), infertility, ability to ease HIV transmission and cofactor in human papilloma virus (HPV)-induced cervical neoplasia. To dominate these problems, vaccination is the best way of controlling the infection. Accordingly, MOMP has been implicated as a potential vaccine candidate through the years. Methods: In this study, MOMP217 gene was cloned in PET28b+ and expressed in E.coli and the protein expression confirmed by SDS-PAGE 10% Gel stained with Comassie Blue dye. Result: Beside the in silico experiments and the epitopic important regions in this conserved fragment, rMOMP217 may be a valuable peptide for immunization study. Conclusion: Conclusively, with approach to animal model study for evaluation of immune system response ability, this truncated protein may be introduced as a candidate in vaccine study. Absolutely, this attempt needs more experimental works. واکسن, کلامیدیا تراکوماتیس, پروتئین اصلی غشاء خارجی MOMP Vaccine, chlamydia trachomatis, MOMP (Major Outer Membrane Protein) 38 46 http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-1659&slc_lang=fa&sid=1 Razieh Bitazar راضیه بیتازر Bitazar1984@gmail.com 3900319475328460043609 3900319475328460043609 No Qazvin University of Medical Sciences, Qazvin, Iran and Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR, Tehran, Iran پژوهشگاه فن آوری های نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی- ابن سینا، تهران، ایران Rezvan Bagheri رضوان باقری Rezvan_b1980@yahoo.com 3900319475328460043610 3900319475328460043610 No Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran. دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی تهران، تهران، ایران Ali Salimi علی سلیمی Ali.salimi.maraghi@gmail.com 3900319475328460043611 3900319475328460043611 No Tehran, Iran. پژوهشکده فن آوری های نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی-ابن سینا، تهران، ایران Bahareh Hajikhani بهاره حاجی خانی B.hajikhani@gmail.com 3900319475328460043612 3900319475328460043612 Yes Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران