fa بررسی مورفولوژی و ایمونوفنوتیپ سلولهای بنیادی مزانشیمی بعد از تعویض سرم گاوی محیط کشت به سرم انسانی بیولوژی (زیست شناسی) Biology پژوهشي Research <p style="text-align: justify;">مقدمه: سلولهای بنیادی مزانشیمی ( MSC ) برای مقاصد سلول درمانی مورد استفاده قرار می گیرند. سرم جنین گاوی (FBS) برای رشد سلولهای بنیادی در محیط کشت ضروری می باشد. از آنجائیکه ممکن است FBS واکنشهای ایمونولو&zwj;یک را در افراد گیرنده MSC تحریک کند و یا باعث انتقال عوامل پاتو&zwj;ژن&zwj;یک گردد. لذا در موارد بالینی بایستی FBS از سلولها حذف گردد. این مطالعه مشخصات سیتولوژیک و فلوسیتومتریک سلولهای بنیادی مشتق از چربی( ASCs) را در مدیومهای حاوی FBS، سرم انسانی و جایگزینی FBS با سرم انسانی و برعکس مورد ارزیابی قرار خواهد داد. مواد و روشها: سلولهای بنیادی مشتق از چربی بعد از جداسازی کشت داده شدند. جهت بررسی سیتولوژیک سلولهای پاساژ دوم بر روی لامل کشت داده شدند و بعد از فیکساسیون با هماتوکسیلین و ائوزین رنگ شدند. سلولهای پاساژ دوم با آنتی بادی های CD44 و CD90 رنگ آمیزی</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>زمینه و هدف</strong>: سلول‌های بنیادی مزانشیمی (<span dir="LTR">Mesenchymal Stem Cells-MSC</span>) برای مقاصد سلول درمانی مورد استفاده قرار می‌گیرند. سرم جنین گاوی (<span dir="LTR">Fetal Bovine Serum-FBS</span>) برای رشد سلول‌های بنیادی در محیط کشت ضروری می‌باشد. از آنجایی که ممکن است <span dir="LTR">FBS</span> واکنش‌های ایمونولوژیک را در افراد گیرنده <span dir="LTR">MSC</span> تحریک کند و یا باعث انتقال عوامل پاتوژنیک گردد، لذا در موارد بالینی بایستی <span dir="LTR">FBS</span> از سلول‌ها حذف گردد و با سرم انسانی جایگزین گردد. این مطالعه مشخصات سیتولوژیک و فلوسیتومتریک سلول‌های بنیادی مشتق از چربی (<span dir="LTR">ASCs- Adipose</span> <span dir="LTR">Tissue Stem Cells</span>) را در مدیوم‌های حاوی <span dir="LTR">FBS</span>، سرم انسانی و جایگزینی <span dir="LTR">FBS</span> با سرم انسانی و برعکس مورد ارزیابی قرار داده است.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>روش&shy; کار</strong>: سلول های بنیادی مشتق از چربی بعد از جداسازی کشت داده شدند. جهت بررسی سیتولوژیک سلول‌های پاساژ دوم بر روی لامل کشت داده و بعد از فیکساسیون با هماتوکسیلین و ائوزین رنگ شدند. سلول‌های پاساژ دوم با آنتی بادی‌ها مثبت و منفی<span dir="LTR">CD44 </span>، <span dir="LTR">CD90</span> برای سلول‌های بنیادی، <span dir="LTR">CD45</span> و <span dir="LTR">CD11</span> رنگ آمیزی شده و مورد ارزیابی قرار گرفتند.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>یافته &shy;ها</strong>: سلول‌های بنیادی تکثیر یافته در <span dir="LTR">FBS</span> شکل پهنی داشته و به کندی تکثیر پیدا کردند در حالی که سلول‌های دارای سرم انسانی دوکی شکل بود و به سرعت رشد می‌کردند. تعویض سرم از <span dir="LTR">FBS</span> به سرم انسانی باعث تغییر شکل سلول‌ها از پهن به دوکی گردید. در نتایج <span dir="LTR">forward scatter</span> سلول‌های بنیادی کشت داده شده در <span dir="LTR">FBS</span> به طور معنی‌داری بزرگ‌تر از سایر گروه‌ها بودند (05/0 <span dir="LTR">p<</span>). تفاوت معنی داری در بیان مارکرهای ایمونوفنوتیپیک مثبت و منفی مشاهده نشد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>نتیجه&shy; گیری</strong>: نتایج این مطالعه نشان دهنده این است که سرم انسانی، شرایط کشت سلول‌های بنیادی مزانشیمی را در مقایسه با مدیوم حاوی <span dir="LTR">FBS</span> قابل دسترس تجاری ، بهبود می‌بخشد. تعویض <span dir="LTR">FBS</span> به سرم انسانی روش مفید برای سلول‌های بنیادی خواهد بود که قبلاً در <span dir="LTR">FBS</span> کشت داده شده و یا فریز گردیده‌اند.</p> <p style="text-align: justify;">ده و مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج: سلولهای بنیادی تکثیر یافته در FBS شکل پهنی داشته و به کندی تکثیر پیدا کردند در حالیکه سلولهای دارای سرم انسانی دوکی شکل بود و به سرعت رشد می کردند. تعویض سرم از FBS به سرم انسانی باعث تغییر شکل سلولها از پهن به دوکی گردید. در نتایج forward scatter سلولهای بنیادی کشت داده شده در FBS بطور معنی داری بزرگتر از سایر گروهها بودند(p<0.05). تفاوت معنی داری در بیان مارکرهای ایمونوفنوتیپیک مثل CD44, CD90 مشاهده نشد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشاندهنده این است که سرم انسانی، شرایط کشت سلولهای بنیادی مزانشیمی را در مقایسه با مدیوم حاوی FBS قابل دسترس تجاری، بهبود می بخشد. تعویض FBS به سرم انسانی روش مفید برای سلولهای بنیادی خواهد بود که قبلاً در FBS کشت داده شده و یا فریز گردیده اند.</p> <p><strong>Background</strong>: Mesenchymal Stem Cells (MSCs) are used for cell therapy purposes. Fetal Bovine Serum (FBS) in culture media is essential for growth. As FBS may induce an immunological reaction and transfer pathogenic agents to MSC recipients, this study was designed to evaluate Adipose Tissue Stem Cells (ASCs) in FBS, human serum, switching of FBS to human serum and vice versa by cytology and flow cytometry.</p> <p><strong>Results</strong>: ASCs isolated and expanded in medium containing FBS were flat shape and slowly growing versus to those grown in medium containing human serum. The forward scatter data significantly demonstrated ASCs in FBS had large size as compared to others (p<0.05). Morphology of ASCs were similar to flow cytomertic findings. There are no significant differences in immunophenotypic markers of ASCs such as CD44, and CD90 grown in different media. However mean fluorescence intensity was higher for CD44 in human serum groups.</p> <p><strong>Conclusion</strong>: These results indicate that medium enriched with human serum improved the culture condition of ASCs in comparison with medium enriched with commercially available FBS. Switching of FBS to human serum may be a useful method for stem cells that are grown in medium containing FBS or frozen in FBS</p> سرم انسانی, سرم جنین گاوی, سلول‌های بنیادی مزانشیمی, سلول‌های بنیادی مشتق از چربی Human serum, FBS, MSC, ASC 105 113 http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1338-1&slc_lang=fa&sid=1 Hajar Shafaei هاجر شفائی shafaei49@gmail.com 3900319475328460035531 3900319475328460035531 Yes Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران Ebrahim Esfandiari ابراهیم اسفندیاری esfandiari@med.mui.ac.ir 3900319475328460035532 3900319475328460035532 No Department of Anatomical Sciences and Molecular Biology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران Hassan Baghernezhad حسن باقرنژاد hbager1389@yahoo.com 3900319475328460035533 3900319475328460035533 No Bonyan Cellular Kosar Company, East Azarbaijan Science and Technology Park, Tabriz, Iran. شرکت بنیان سلول کوثر، تبریز، ایران