Razi Journal of Medical Sciences

fa مطالعه اثر آنتی اکسیدانی عصاره تام و فلاونوییدی گیاه سس (Cuscuta lehmanniana Bunge) بر سلول های 12 PC مدل دیابتیک Study of the antioxidant effects of total and flavonoiods extracts of Cuscuta lehmanniana Bunge against on PC12 cells in vitro diabetic model علوم تشریحی Anatomy پژوهشي Research زمینه و هدف : نوروپاتی های محیطی و مرکزی یکی از مهمترین عوارض ابتلا به دیابت شیرین می باشد، تاکنون مکانیسم های دقیق سلولی و مولکولی نوروتوکسیسیتی ناشی از افزایش گلوکز مشخص نگردیده است. در تحقیقات سال های اخیر به نقش رادیکال های آزاد به عنوان یکی از دلایل نوروپاتی های دیابتیک توجه شده است. بر این مبنا استفاده از آنتی اکسیدان ها یکی از گزینه های درمانی برای جلوگیری از آسیب های ناشی از عوامل استرس اکسیداتیو مانند افزایش گلوکز می باشد. در تحقیق حاضر اثرآنتی اکسیدانی عصاره تام و فلاو نوییدی گیاه سس با نام علمی Cuscuta lehmanniana Bunge ، که گیاه انگلی بومی ایران می باشد ، برسلول‌های 12 PC تحت تیمار با افزایش گلوکز به عنوان مدل سلولی نوروپاتی دیابتیک استفاده گردید. روش کار : در تحقیق حاضر از سلول های رده 12 PC در محیط کشت با افزایش گلوکز به عنوان القا مدل سلولی نوروپاتی دیابتیک استفاده گردیده است.از گیاه سس، پس از جمع آوری عصاره تام و فلاونوییدی تهیه گردید. فعالیت به دام اندازی رادیکال های آزاد عصاره های گیاه به روش (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) DPPH و سپس اثر عصاره تام و فلاو نوییدی بر روی سلول های 12 PC تحت افزایش گلوکز با استفاده از تست MTT ، رنگ آمیزی هسته ای PI-Annexin و وسترن بلاتینگ ( Western blot ) برای پروتئین پروآپوپتوتیک Bax مورد مطالعه قرار گرفت . یافته ‌ ها : نتایج DPPH نشان داد که عصاره تام و فلاو نوییدی گیاه سس دارای خاصیت به دام اندازی رادیکال های آزاد می باشند. پس از به کار بردن عصاره فلاو نوییدی با غلظت µg/ml 50 رادیکال های آزاد نسبت به گروه کنترل، 45/70% کاهش نشان داده اند . نتایج تست MTT هم چنین نشان داد که عصاره تام گیاه در غلظت 100µg/ml و عصاره فلاو نوییدی با غلظت 50µg/ml توان حیاتی سلول ها را به ترتیب 70 و 83% افزایش داده است. رنگ آمیزی Annexin نشان داد که تعداد سلول های آپوپتوتیک در مقایسه با گروه کنترل از 2/38% به 8/15% کاهش یافته است، سنجش وسترن بلاتینگ هم چنین نشان دهنده کاهش معنی دار بیان پروتئین پروآپوپتوتیک Bax متعاقب استفاده از عصاره تام و فلاونوییدی می ‌ باشد. نتیجه گیری: بر اساس یافته های این تحقیق عصاره تام و فلاونوییدی گیاه سس دارای خاصیت نوروپروتکتیو در برابر افزایش گلوکز در محیط کشت می ‌ باشند، به نظر می رسد خواص درمانی این گیاه بتواند در کنترل و یا کاهش نوروپاتی های دیابتیک موثر واقع گردد. Background: Mellitus (DM). The exact mechanisms of diabetic neurotoxicity are still unknown. Recently oxidativestress is introduced as one of the factors for diabetics’ neuropathies. Antioxidants also used astherapeutic agents to reduce the side effects of diabetes. In the present research the antioxidant effectsof total and flavonoid extracts of Cusseta lehmaniana Bunge on high glucose inducted Pc12 werestudied.Central and peripheral neuropathies are the most common side effects of DiabetesMethods: lehmaniana Bungs were preparedexposed to extracts. Antioxidant activity of extracts, cell viability and apoptosis were studied byDPPH, MTT, Annexin staining and Western Blotting respectively.PC12 cell line treated with high glucose was used. Total and flavonoid extract of C.. PC12 cells treated with 6X fold high glucose concentrationResults: Bungs extract increased cell viability after 3 hours pretreatment. DPPH assay demonstrated 50 μg/mlflavonoid extract can increased radical scavenging inhibits compare with ascorbic acid. Several assayswere used for evaluated of anti apoptotic effect such as: Annexin, SubG1and Western blotting forexpression of Bax protein.The MTT result showed 50μg/ml of flavonoid extract and 100μg/ml of total C. lehmanianaConclusion: lehmaniana Bungs have the potential to protect PC12 cells against glucose neurotoxicity by reducingapoptosis via increased Bax expression protein.Based on our findings, it is concluded that both total and flavonoid extract of C. گیاه سس، نوروپاتی دیابتیک، سلول های 12 PC PC12 cells, Diabetic neuropathy, C. lehmaniana Bunge. 17 26 http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-1276&slc_lang=fa&sid=1 Mona Farhadi مونا فرهادی 3900319475328460020126 3900319475328460020126 No Seyed Behnamaddin Jameie سید بهنام الدین جامعی 3900319475328460020127 3900319475328460020127 Yes Parisa Hayat پریسا حیات 3900319475328460020128 3900319475328460020128 No