Razi Journal of Medical Sciences

fa بررسی اثر تاموکسیفن بر روی فعالیت آنزیم نیتریک اکسید سینتاز(NOS) در تکامل هیپوکامپ موش صحرایی Assessment of Tamoxifen Effects on Nitric Oxide Synthase (NOS) in Rat's Developing Hippocampus فارماکولوژی Pharmacology پژوهشي Research زمینه و هدف: استروئیدهای مادری اثرات گوناگونی بر روی تکامل مغز دارند. تاموکسیفن، بعنوان آنتاگونیست استروژن در مغز، باعث مرگ سلولی در سلولهای هیپوکامپ در حال تکامل موش صحرائی می‌گردد. استروژن تاثیر مهمی بر روند اعمال شناختی، یادگیری، پیری، آنژیوژنزیس، نوروژنزیس و حفاظت نورون‌ها دارد. هدف از این مطالعه بررسی اثر تاموکسیفن به عنوان آنتاگونیست استروژن بر فعالیت آنزیم نیتریک اکسید سینتاز( NOS = Nitric oxide synthase ) موجود در نورون‌های پیرامیدال هیپوکامپ در حال تکامل موش صحرائی بود. روش بررسی: در این مطالعه که از نوع تجربی( experimental ) بوده است، 12 دسته موش صحرائی در 3 گروه کنترل، تجربی و Sham بررسی شدند که در هر گروه 4 رده سنی جنین فول‌ترم( E22 )، نوزاد یک روزه( P1 )، یک هفته( P7 ) و سه هفته( P21 ) مورد آزمایش قرار گرفت. تزریق تاموکسیفن به میزان 350 میکروگرم در حلال پروپیلن گلیکول، 2 روز قبل از زایمان، بصورت داخل صفاقی، روزی 2 بار انجام گرفت. پس از تهیه نمونه و برش انجمادی، واکنش هیستوشیمی بر روی ناحیه CA1 هیپوکامپ انجام گردید و میزان واکنش NADPH-diaphorase ( Reduced form of Nicotinamide adenine-dinucleotide phosphate ) بوسیله میکروسکوپ نوری مطالعه گردید. آنالیز نهایی توسط برنامه آماری ( version 11.0 ) SPSS و Independent-Samples T Test در تمام گروه‌ها انجام گردید. یافته‌ها: نتایج مشخص می‌سازد که در مراحل اولیه تکامل، تراکم سلولی کم بوده و بتدریج ضخامت لایه سلولی افزایش می‌یابد، بطوری که در هفته سوم بعد از تولد بیش‌ترین ضخامت مشاهده می‌شود. با توجه به نیمه عمر کوتاه تاموکسیفن، دیده شد که این ماده قادر است بیش‌ترین اثر را بر گروه E22 و P1 و همچنین P7 بگذارد و رسپتور استروژن را بلوک کند. در این مطالعه در نمونه‌هایی که تاموکسیفن دریافت نکردند، به دلیل وجود استروژن، میزان واکنش NADPH-diaphorase که بیانگر میزان فعالیت NOS می‌باشد، بیش‌تر بود و در نمونه‌هایی که تاموکسیفن دریافت نمودند، در مراحل اولیه دریافت، یعنی قبل از تولد و 16 ساعت بعد از تولد به دلیل بلوکه شدن رسپتور استروژن، میزان واکنش NADPH-diaphorase کاهش یافت و با گذشت زمان، این پاسخ رو به زوال گذاشت. از طرفی تعداد سلولهای عصبی در ناحیه CA1 هیپوکامپ متناسب با کاهش فعالیت NOS در این ناحیه، کاهش نشان داد. کاهش فعالیت NOS و نیز کاهش سلولهای هیپوکامپ در گروه‌های جنین 22 روزه(فول ترم) و نوزاد یک روزه و یک هفته‌ای مشاهده شد که به نظر می‌رسد که به علت کوتاه بودن عمر تاموکسیفن باشد. نتیجه‌گیری: نتایج حاصل از مطالعه حاضر، نشان می‌دهد که هورمون استروژن بر رشد و تکامل سلولهای پیرامیدال هیپوکامپ که با واسطه نیتریک اکسید صورت می‌گیرد، موثر می‌باشد. Background & Aim: treatment, as an estrogen antagonist, induces cell death in rat's developing hippocampus. Estrogen has avariety of physiological effects on the nervous system, including regulation of cognitive functions, learning,aging, angiogenesis, neurogenesis, and neuroprotective effects. In the present study, we demonstrated theeffects of TAM as an estrogen antagonist on nitric oxide synthase activity in rat's developing hippocampalpyramidal neurons.Maternal steroids modulate various functions in the developing brain. Tamoxifen (TAM)Material and Method: animals were divided randomly into control, experimental and sham groups. Each group contained full termembryo (Egroup received a total of four doses of TAM,i.e. 250 mg/kg TAM in propylene glycole was injectedintraperitoneally twice a day for two days. Their hippocampus was removed 6 hours after the last injection.Animals at the same gestational age were used as shams and controls. The latter received only propyleneglycole. The hippocampus was dissected out and stored in fixative and sucrose. Cryostat sections were thawmountedon gelatin slides. The sections were incubated for NADPH-diaphorase histochemistry by lightmicroscope. Independent sample t-test and SPSS version 11.0 were used to analyze the data.The present experimental study was conducted on twelve groups of adult rats. The22), one-day neonate (P1), one-week neonate (P7), and three -week neonate (P21). The experimentalResults: thickness increases so that the most thickness is seen in the third week after birth. Considering the short halftimeof TAM, it was observed that tamoxifen had its greatest effects on Eestrogen receptors. In the group that didn't receive tamoxifen, due to the presence of estrogen NADPHdiaphoraseactivity, which indicates NOS activity level, strengthened. On the other hand, the animals whichreceived tamoxifen in the early stage showed a decrease in NADPH-diaphorase activity owing to estrogenreceptor blockade. Furthermore, the number of neural cells in CA1 hippocampal region showed a decrease inproportion to the reduction in NOS activity level in this region. The decreased number of neural cells and NOSactivity, which was seen in EWe found that in the early stage of development cellular density decreases and gradually cellular22, P1 and P7 groups and blockaded22, P1 , P7 groups, seems to be due to the short half-time of tamoxifen.Conclusion: oxide-mediated growth and development of hippocampal pyramidal cells.These findings indicate that estrogen and selective estrogen modulators can influence nitric کلیدواژه‌ها: 1 – تاموکسیفن 2 – نیتریک اکسید 3 – ان آ دی پی اچ ـ دی 4 – هیپوکامپ Key Words: 1)Tamoxifen 2)Nitric Oxide 3)NADPH-d 4)Hippocampus 181 190 http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-845&slc_lang=fa&sid=1 M. Nobakht, ملیحه نوبخت 3900319475328460017645 3900319475328460017645 Yes M. Shafiee , معصومه شفیعی 3900319475328460017646 3900319475328460017646 No P. Tabatabaee, پروانه طباطبایی 3900319475328460017647 3900319475328460017647 No T. Rastegar, طیبه رستگار 3900319475328460017648 3900319475328460017648 No