Razi Journal of Medical Sciences

fa جداسازی زنجیره‌های گلوبین به روش کروماتوگرافی تعویض یونی در تشخیص هموگلوبینوپاتی‌ها The Separation of Globin Chains by Ion Exchange Chromatography inorder to Identify Hemoglobinopathies بیوشیمی Biochemistry پژوهشي Research زمینه و هدف: هموگلوبینوپاتی‌ها در اثر نقص در ژن سنتز کننده زنجیره‌های هموگلوبین بوجود می‌آیند. در مواقعی که موتاسیون در ژن زنجیره‌های آلفا یا بتا بصورتی باشد که تغییر بار الکتریکی هموگلوبین محسوس نباشد، برای تفکیک می‌توان از کروماتوگرافی تعویض یونی بهره جست. هدف از انجام این مطالعه، تشخیص واریان‌های زنجیره گلوبین به روش کروماتوگرافی تعویض یونی بود و از این لحاظ نمونه برای تعیین توالی ژنی مربوط به زنجیره خاص آماده شد. روش بررسی: مطالعه از نوع توصیفی بود. در این مطالعه، 20 مورد که دارای حداقل یک هموگلوبین غیرطبیعی بودند، مورد بررسی قرار گرفتند. بر روی نمونه‌ها آزمایشات شمارش کامل سلولهای خونی( CBC = Cell blood count )، اندازه‌گیری هموگلوبین A2 و F ، الکتروفورز بر روی استات سلولز و سیترات آگار و تست حلالیت برای تایید هموگلوبین S ، انجام گردید و در مرحله پایانی روی نمونه‌ها، کروماتوگرافی تعویض یونی صورت گرفت. برای تجزیه و تحلیل آماری از نرم‌افزار ( version 14 ) SPSS استفاده گردید. یافته‌ها: طبق روشهای الکتروفورزی، هر 20 مورد دارای الگوی الکتروفورزی غیرطبیعی بودند که در زمره هیچ یک از انواع هموگلوبین‌های غیرطبیعی C ، S ، D و G طبقه‌بندی نمی‌شوند. بعد از انجام کروماتوگرافی کربوکسی متیل سلولز، مشخص گردید که 15 مورد، در زنجیره آلفا، 3 مورد، در زنجیره بتا و 2 مورد، هم در زنجیره آلفا و هم در زنجیر بتا دچار اختلال بوده‌اند. نتیجه‌گیری: بر طبق نتایج بدست آمده، روش مورد استفاده قادر به تفکیک زنجیره‌های جهش یافته آلفا و بتا است و می‌تواند در تشخیص قطعی عارضه بوسیله تعیین ردیف بازهای DNA مؤثر باشد. در ضمن جهت پیشگیری از بروز موارد جدید بتا تالاسمی توأم با هموگلوبینوپاتی‌ها که در بعضی مواقع می‌تواند موجب بروز علایم شدید بالینی گردد، می‌توانیم با استفاده از این روش، افراد را از نظر هموگلوبینوپاتی‌ها، غربالگری نمائیم. Background & Aim: Since the mutant Hbs do not have any obvious electrical charge, globin chain separation is helpful for the diagnosis ofunknown Hbs. Therefore, the present study was carried out to detect alpha or beta chain variants by cation exchangechromatography.There are several point mutations in hemoglobin(Hb) genes which can cause hemoglobinopathy.Material and Method: count(CBC), HbA2 and HbF percentages were determined by routine methods, and cellulose acetate and citrate agarelectrophoresis were performed on all the samples. For HbS confirmation, solubility test was performed and globin chainswere separated by carboxymethyl cellulose(CMC) chromatography in the presence of 8 M urea. SPSS version 14 was usedfor statistical analysis.In this descriptive study, 20 samples having abnormal Hb were selected. Complete blood cellResults: agar electrophoresis. CMC chromatography revealed that three patients had abnormal beta chains, 15 had abnormal alphachains, and 2 remaining samples had abnormal alpha and beta chains.According to the obtained results, all of the samples had an abnormal band on cellulose acetate and citrateConclusion: helpful guideline for the selection of an appropriate gene for DNA sequencing. Moreover, this method is useful to screen thecases for hemoglobinopathies and beta thalassemia coexistance, which can sometimes lead to severe clinicalmanifestations.Mutant alpha and beta chains can be detected by CMC chromatography and globin chain separation is a کلیدواژه‌ها: 1 – هموگلوبینوپاتی 2 – کروماتوگرافی تعویض یونی 3 – واریان‌های زنجیره گلوبین Key Words: 1) Hemoglobinopathy 2) Ion Exchange Chromatography 3) Variants of Globin Chains 157 164 http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-842&slc_lang=fa&sid=1 F. Moeini Alishah, فاطمه معینی علیشاه 3900319475328460017632 3900319475328460017632 No L. Hosseini Gohari, لادن حسینی گوهری 3900319475328460017633 3900319475328460017633 Yes B.Sh. Shamsian, بی بی شهین شمسیان 3900319475328460017634 3900319475328460017634 No L. Mosta'an, لیلا مستعان 3900319475328460017635 3900319475328460017635 No