%0 Journal Article %A Amerian, Milad %A Nazarian, Shahram %T Evaluation and comparison of antibody titers against single recombinant proteins, mixtures and chimer CTXB, TCPA and CTXB-TCPA %J Razi Journal of Medical Sciences %V 24 %N 163 %U http://rjms.iums.ac.ir/article-1-4920-fa.html %R %D 2018 %K Vibrio cholera, ctxB, tcpA, Chimeric recombinant, Antibody titer, %X زمینه و هدف: وبا به عنوان بیماری اسهالی یکی از مهم‌ترین علل مرگ و ناتوانی در افراد جوامع مختلف به شمار می‌رود. فاکتور کلونیزاسیون پیلی tcpA و توکسین کلرا مهم‌ترین فاکتورهای بیماری‌زایی ویبریوکلرا می‌باشند. زیر واحد B سم کلرا (ctxB) و tcpA توانایی القای پاسخ های ایمنی را دارند. ﻫﺪف از ایﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ، ﺗﻮﻟﯿﺪ پروتئین های نوترکیب CTXB ، TCPA و CTXB-TCPA و مطالعه ایمنی زایی و مقایسه تیتر آنتی بادی کایمر، مخلوط و جداگانه پروتئین ‌ها‌ی نوترکیب در موش بود. روش کار: در این مطالعه تجربی، ژن هایctxB ،tcpA و کایمر ctxB-tcpA در وکتورهای بیانی (+) pET28a و (+) pET32a همسانه سازی و پلاسیمدهای نوترکیب به coli BL21 DE3. E منتقل شدند. بیان پروتئین های نوترکیب با IPTG القا و با روش SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ بررسی شد. جهت تخلیص پروتئین نوترکیب از کروماتوگرافی تمایلی Ni-NTA استفاده شد. ایﻤن سازی موش‌ها ﺑﻪ روش درون صفاقی و زیر پوستی انجام شد. ﺗﯿﺘﺮ آنتی‌بادی در سرم موش های ایمن شده ﺑﺎ روش اﻻیﺰا ﻣﻮرد ارزیﺎﺑﯽ ﻗﺮار گرفت. یافته‌ها: آنالیز SDS PAGE و وسترن بلاتینگ، بیان و تخلیص پروتئین های نوترکیب را تائید کرد. میزان پروتئین های خالص شده CTXB، TCPA و CTXB-TCPA به ترتیب 570/15، 533/11 و 100/33 میلی گرم در لیتر بود. نتایج الایزا نشان داد که ایمنی‌زایی موش ها به خوبی صورت پذیرفته است. تفاوت معنی داری در تیتر آنتی بادی علیه آنتی ژن ‌ها‌ی CTXB-TCPA و مخلوط TCPA با CTXB وجود نداشت. همچنین ﺗﻔﺎوت معنی‌داری در ﺗﯿﺘﺮ آنتی‌بادی‌ حاصل از تزریق درون صفاقی و زیرپوستی مشاهده نشد. نتیجه‌گیری: اﺧﺘﻼف جزئی در ﺗﯿﺘﺮ آنتی‌بادی پروتئین‌ها ﻣﻤﮑﻦ اﺳﺖ ﺑﻪ ﻃﻮل ﻋﻤﺮ سلول‌های ﺧﺎﻃﺮه ﺣﺎﺻﻠﻪ در ایﻦ گروه‌ها و همچنین روش تزریقی آن‌ها ارﺗﺒﺎط داشته باشد. با توجه به مزیت های پروتئین های کایمر، CTXB-TCPA می تواند جایگزین مناسبی برای مخلوط پروتئین ها جهت تحریک سیستم ایمنی باشد. %> http://rjms.iums.ac.ir/article-1-4920-fa.pdf %P 80-91 %& 80 %! study of antibody titers against single proteins, mixtures and chimer CTXB, TCPA and CTXB-TCPA %9 Research %L A-10-3652-1 %+ Imam Hossain University, Tehran, Iran. %G eng %@ 2228-7043 %[ 2018