Research code: 28671
Ethics code: IR.IUMS.FMD.REC.1402.526
Clinical trials code: IR.IUMS.FMD.REC.1402.526
مرکز تحقیقات ایمونولوژی، پژوهشکده ایمونولوژی و بیماری‌های عفونی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران، و گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران ، assarehma@gmail.com
چکیده: (92 مشاهده)
زمینه و هدف: آنتی‌بادی‌های ضد DNA دو رشته‌ای (anti-dsDNA) یکی از نشانگرهای اختصاصی بیماری لوپوس اریتماتوز سیستمیک (SLE) هستند که ارتباط نزدیکی با شدت بیماری، به‌ویژه نفریت لوپوسی دارند. با وجود آنکه روش ELISA به‌طور گسترده برای شناسایی این آنتی‌بادی‌ها استفاده می‌شود، احتمال بروز نتایج مثبت کاذب در آن وجود دارد. در مقابل، آزمون ایمونوفلورسانس غیرمستقیم با استفاده از Crithidia luciliae (CLIFT) به دلیل ویژگی بالای خود، می‌تواند به‌عنوان روش تأییدی در تشخیص SLE مورد استفاده قرار گیرد. هدف این مطالعه، طراحی و ارزیابی لام تشخیصی ایمونوفلورسانس غیرمستقیم بر پایه Crithidia luciliae برای شناسایی آنتی‌بادی ضد dsDNA و مقایسه عملکرد آن با روش ELISA بود.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه، سلول‌های Crithidia luciliae در شرایط استاندارد کشت داده شدند. پس از آماده‌سازی و فیکساسیون سلول‌ها بر روی لام‌ها، تست ایمونوفلورسانس غیرمستقیم با استفاده از سرم ۱۰۰ بیمار (۵۰ نمونه مثبت و ۵۰ نمونه منفی از نظر anti-dsDNA طبق نتایج ELISA) انجام شد. نتایج آزمون CLIFT از نظر حساسیت، ویژگی، ارزش پیش‌بینی مثبت و منفی، دقت کلی و ضریب توافق کاپا با روش ELISA مقایسه و تحلیل آماری شد.
یافته‌ها: نتایج نشان داد که روش CLIFT دارای ویژگی ۱۰۰٪، حساسیت ۴۶٪، ارزش پیش‌بینی مثبت ۱۰۰٪ و ارزش پیش‌بینی منفی حدود ۶۴.۹٪ بود. دقت کلی آزمون ۷۳٪ و ضریب کاپای کوهن برابر با ۰.۴۶ (توافق متوسط) بود. آزمون فیشر نشان‌دهنده اختلاف آماری معنادار بین نتایج دو روش (p ≈ 0.0001) بود.
نتیجه‌گیری: روش CLIFT با وجود ویژگی بسیار بالا، به‌دلیل حساسیت محدود، نمی‌تواند به‌تنهایی به‌عنوان ابزار غربالگری اولیه مورد استفاده قرار گیرد؛ اما در کنار ELISA و یافته‌های بالینی، می‌تواند به‌عنوان روش تأییدی با ارزش در تشخیص و پایش بیماران مبتلا به SLE به‌کار رود. همچنین بهینه‌سازی فاکتورهایی مانند pH، قدرت یونی بافر و نفوذپذیری سلولی می‌تواند در افزایش حساسیت این روش مؤثر باشد.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه، سلول‌های Crithidia luciliae در شرایط استاندارد کشت داده شدند. پس از آماده‌سازی و فیکساسیون سلول‌ها بر روی لام‌ها، تست ایمونوفلورسانس غیرمستقیم با استفاده از سرم ۱۰۰ بیمار (۵۰ نمونه مثبت و ۵۰ نمونه منفی از نظر anti-dsDNA طبق نتایج ELISA) انجام شد. نتایج آزمون CLIFT از نظر حساسیت، ویژگی، ارزش پیش‌بینی مثبت و منفی، دقت کلی و ضریب توافق کاپا با روش ELISA مقایسه و تحلیل آماری شد.
یافته‌ها: نتایج نشان داد که روش CLIFT دارای ویژگی ۱۰۰٪، حساسیت ۴۶٪، ارزش پیش‌بینی مثبت ۱۰۰٪ و ارزش پیش‌بینی منفی حدود ۶۴.۹٪ بود. دقت کلی آزمون ۷۳٪ و ضریب کاپای کوهن برابر با ۰.۴۶ (توافق متوسط) بود. آزمون فیشر نشان‌دهنده اختلاف آماری معنادار بین نتایج دو روش (p ≈ 0.0001) بود.
نتیجه‌گیری: روش CLIFT با وجود ویژگی بسیار بالا، به‌دلیل حساسیت محدود، نمی‌تواند به‌تنهایی به‌عنوان ابزار غربالگری اولیه مورد استفاده قرار گیرد؛ اما در کنار ELISA و یافته‌های بالینی، می‌تواند به‌عنوان روش تأییدی با ارزش در تشخیص و پایش بیماران مبتلا به SLE به‌کار رود. همچنین بهینه‌سازی فاکتورهایی مانند pH، قدرت یونی بافر و نفوذپذیری سلولی می‌تواند در افزایش حساسیت این روش مؤثر باشد.
واژه‌های کلیدی: لوپوس اریتماتوز سیستمیک (SLE)، آنتی‌بادی ضد dsDNA، Crithidia luciliae، ایمونوفلورسانس، ELISA، CLIFT
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
ایمونولوژی
ارسال پیام به نویسنده مسئول