Razi Journal of Medical Sciences
مجله علوم پزشکی رازی
RJMS
Medical Sciences
http://rjms.iums.ac.ir
39
journal39
2228-7043
2228-7051
en
jalali
1396
12
1
gregorian
2018
3
1
24
165
online
1
fulltext
fa
روش ساده و کم هزینه جهت جداسازی مونوسیت ها
Simple and Least expensive method for monocyte isolation
ایمنیشناسی
Immunology
پژوهشي
Research
<p dir="RTL"><strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف</span></span></strong>: <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مونوسیتها یکی از اجزای مهم سیستم ایمنی هستند که در پاسخهای التهابی و پاسخ های ایمنی ذاتی نقش مهمی ایفا میکنند؛ بنابراین جداسازی این سلولها در تحقیقات ایمنی شناسی دارای اهمیت فراوان بوده و به همین دلیل روشهای مختلفی برای جداسازی این سلولها ابداع شده است. یکی از کم هزینهترین و آسانترین روشها جداسازی با استفاده از خاصیت چسبندگی این سلولها است که در این مطالعه مورد بررسی قرار گرفته است.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">روش کار</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">: در این روش بعد از جداسازی سلولهای تک هستهای خون محیطی، با استفاده از خاصیت چسبندگی مونوسیتها به سطح پلاستیکی این سلولها از سوسپانسیون سلولی جدا سازی شدند و سپس با استفاده از آنتیبادیهای اختصاصی نشاندار با رنگ فلورسنت (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PE</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">FITC</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) متصل شونده به مارکرهای اختصاصی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD11b</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD14</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بر سطح مونوسیتها رنگ آمیزی گردید و درصد خلوص سلولهای جداسازی شده مشخص شد.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">یافتهها</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">: پس از جدا سازی مونوسیتها و بررسی آنها با دستگاه فلوسایتومتری نتایج بیانگر این موضوع بود که 2/90 درصد از سلولهای جداشده دو مارکر </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD11b</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD14</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> را بیان میکردند</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">.</span></span></span><strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></strong><br>
<strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجهگیری</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">: گرچه روشهای جداسازی مختلفی برای مونوسیتها وجود دارد اما هرکدام دارای مزیتها و معایبی هستند. یکی از آسانترین و کمهزینهترین این روشها جداسازی براساس خاصیت چسبندگی این سلولها است که امکان جداسازی این سلولها با درصد خلوص بالا را فراهم میکند.</span></span><br>
<br>
</p>
<p dir="RTL"></p>
<p><strong>Abstract </strong></p>
<p><strong>Background:</strong> Monocytes are a key component of the immune system, which play an important role in inflammatory and innate immune responses. So the isolation of these cells is important in immunology researches and accordingly many methods have been developed for the monocyte isolation. One of the least expensive and simple separation methods is using the <em>ability of these cells</em> to adhere to solid <em>surfaces</em> that were examined in this study.</p>
<p><strong>Methods</strong><strong><span dir="RTL">:</span></strong> In this way, after the isolation of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), monocytes were isolated from cell suspension by using the adhesion ability of these cells to the plastic surface<span dir="RTL">.</span>Isolated monocytes were stained by using specific antibodies labeled with fluorescent dyes (PE, FITC) binding to specific markers on the surface of monocytes CD11b and CD14 and the purity of cells were characterized by flow cytometry.</p>
<p><strong>Results</strong><strong><span dir="RTL">:</span></strong> Flow cytometry results after separation of monocytes shown that 90.2% of cells were expressed two markers CD11b and CD14.</p>
<p><strong>Conclusion:</strong> Although there are several monocyte isolation methods, each of them have advantages and disadvantages. One of the least expensive and Simple method of isolation is using adhesion ability of these cells that provides possibility of monocyte isolation with high purity.</p>
واژگان کلیدی: مونوسیت,جداسازی,خاصیت چسبندگی
Keywords:Monocyte, Isolation, Adhesion ability
30
34
http://rjms.iums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3446-1&slc_lang=fa&sid=1
Negar
Meratian Isfahani
نگار
مرآتیان اصفهانی
nmeratian@gmail.com
3900319475328460038756
3900319475328460038756
No
Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran.
دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.
nafiseh
Esmaeil
نفیسه
اسمعیل
nafesm5@gmail.com
3900319475328460038755
3900319475328460038755
Yes
Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran.
دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.
Abbas
Rezaei
عباس
رضایی
rezaei@mui.ac.ir
3900319475328460038757
3900319475328460038757
No
Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran.
دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.
Ferdous
Mehrabian
فردوس
محرابیان
Mehrabian@med.mui.ac.ir
3900319475328460038758
3900319475328460038758
No
Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran.
دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.
Vida
Homayouni
ویدا
همایونی
vidahomayouni20@yahoo.com
3900319475328460038760
3900319475328460038760
No
Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran.
دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.
Mazdak
Ganjalikhani Hakemi
مزدک
گنجعلی خانی حاکمی
mghakemi@med.mui.Ac.ir
3900319475328460038759
3900319475328460038759
No
Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran.
دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.