TY - JOUR JF - RJMS JO - RJMS VL - 24 IS - 157 PY - 2017 Y1 - 2017/7/01 TI - The isolating Escherichia coli secretory outer membrane vesicles by using tangential-trans flow filtration TT - جداسازی وزیکول‎های ترشحی غشاء خارجی باکتری اشرشیاکلی با استفاده از فیلتراسیون با جریان مماسی N2 - زمینه و هدف: وزیکول‎های غشاء خارجی باکتری‎ها نقش مهمی در فیزیولوژی، بیماری زایی و تعامل بین میزبان و عامل بیماریزا دارند. این وزیکول‎ها به باکتری اجازه می دهند تا آنزیم‌ها و محتویات خود را به شکل محافظت شده منتقل کنند و در زنده ماندن باکتری نقش دارند. از آنجایی که آن‌ها به عنوان نماینده باکتری محسوب می شوند، مطالعه آن‌ها به شناخت بیشتر باکتری‎ها و تعامل آن‌ها با محیط کمک می‌کند. از این رو روش‎های جداسازی این وزیکول‌ها اهمیت ویژه‌ای دارد. لذا، هدف از این پژوهش، معرفی روشی نوین برای جداسازی وزیکول‎های غشاء خارجی باکتری اشرشیاکلی است. روش کار: در روش شناسی حاضر، باکتری اشرشیاکلی انتروتوکسیژنیک در شرایط استاندارد کشت داده شد. سپس مایع رویی کشت جدا گردید و از فیلتراسیون با جریان مماسی برای تغلیظ وزیکول‎ها و سانتریفیوژ دور بالا برای رسوب‌دهی آن‌ها استفاده شد. وزیکول‎های جدا شده توسط میکروسکوپ الکترونی عبوری تایید و وزن مولکولی و میزان غلظت پروتئینی مشخص گردید. یافته‌ها: ریخت شناسی وزیکول‌ها توسط میکروسکوپ الکترونی تایید و اندازه آن‌ها بین 50 تا 100 نانومتر تعیین شد. الگوی الکتروفورتیک نشان دهنده باندهای قوی و ضعیف در ناحیه بین 41-22 کیلودالتون بوده و غلظت پروتئین وزیکول‎های تخلیص شده 542 میکروگرم مشخص گردید. نتیجه‌گیری: نتایج به دست آمده نشان می‌دهد که در نتیجه استفاده از روش ارائه شده در این مطالعه علاوه بر ارائه محصولی همسان، از بعد اقتصادی و زمانی نسبت به روش‎های رایج مزایای مثبتی دارد و می‌تواند زمینه ساز جداسازی این وزیکول‌ها در سطح صنعتی نیز باشد. SP - 8 EP - 14 AU - Beikzadeh, Babak AU - Nikbakht Brujeni, gholamreza AU - Eftekhari, Zohre AU - Erfanmanesh, Ahmad AD - University of Tehran, Tehran, Iran KW - Secretory outer membrane vesicles KW - tangential- trans flow filtration KW - Escherichia coli UR - http://rjms.iums.ac.ir/article-1-4546-fa.html ER -