XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Nazarian S, Amerian M. Evaluation and comparison of antibody titers against single recombinant proteins, mixtures and chimer CTXB, TCPA and CTXB-TCPA. RJMS. 2018; 24 (163)
URL: http://rjms.iums.ac.ir/article-1-4920-fa.html
نظریان شهرام، عامریان میلاد. ارزیابی و مقایسه تیتر آنتی بادی علیه پروتئین های نوترکیب منفرد، مخلوط و کایمر CTXB، TCPA وTCPA CTXB-. مجله علوم پزشکی رازی. 1396; 24 (163)

URL: http://rjms.iums.ac.ir/article-1-4920-fa.html


استادیار
چکیده:   (61 مشاهده)
زمینه و ﻫﺪف: وبا به عنوان بیماری اسهالی یکی از مهم‌ترین علل مرگ و ناتوانی در افراد جوامع مختلف به شمار می‌رود. فاکتور کلونیزاسیون پیلی tcpA  و توکسین کلرا مهم‌ترین فاکتورهای بیماری‌زایی ویبریوکلرا می‌باشند. زیر واحد B سم کلرا (ctxB) و  tcpAتوانایی القای پاسخ های ایمنی را دارند. ﻫﺪف از ایﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ، ﺗﻮﻟﯿﺪ پروتئین های نوترکیب CTXB ، TCPA و CTXB-TCPA و مطالعه ایمنی زایی و مقایسه تیتر آنتی بادی کایمر، مخلوط و جداگانه پروتئین ‌ها‌ی نوترکیب در موش بود.
روش بررسی: در این مطالعه تجربی، ژنهایctxB ،tcpA و کایمر ctxB-tcpA در وکتورهای بیانی pET28a(+) و pET32a(+) همسانه سازی و پلاسیمدهای نوترکیب به  coli BL21 DE3 E. منتقل شدند. بیان پروتئین های نوترکیب با IPTG القا و با روش SDS-PAGE  و وسترن بلاتینگ بررسی شد. جهت تخلیص پروتئین نوترکیب از کروماتوگرافی تمایلی Ni-NTA استفاده شد. ایﻤﻨ سازی موش‌ها ﺑﻪ روش درون صفاقی و زیر پوستی انجام شد. ﺗﯿﺘﺮ آنتی‌بادی در سرم موش های ایمن شده ﺑﺎ روش اﻻیﺰا ﻣﻮرد ارزیﺎﺑﯽ ﻗﺮار گرفت.
یافته‌ها: آنالیز  SDS PAGE و وسترن بلاتینگ، بیان و تخلیص پروتئین های نوترکیب را تائید کرد. میزان پروتئین های خالص شده  CTXB ، TCPA و CTXB-TCPA به ترتیب  570/15، 533/11 و 100/33 میلی گرم در لیتر بود. نتایج الایزا نشان داد که ایمنی‌زایی موشها به خوبی صورت پذیرفته است.  تفاوت معنی داری در تیتر آنتی بادی علیه آنتی ژن ‌ها‌ی CTXB-TCPA و مخلوط TCPA با  CTXBوجود نداشت. هم‌چنین ﺗﻔﺎوت معنی‌داری در ﺗﯿﺘﺮ آنتی‌بادی‌ حاصل از تزریق درون صفاقی و زیرپوستی مشاهده نشد. 
نتیجه‌گیری: اﺧﺘﻼف جزئی در ﺗﯿﺘﺮ آنتی‌بادی پروتئین‌ها ﻣﻤﮑﻦ اﺳﺖ ﺑﻪ ﻃﻮل ﻋﻤﺮ سلول‌های ﺧﺎﻃﺮه ﺣﺎﺻﻠﻪ در ایﻦ گروه‌ها و هم‌چنین روش تزریقی آن‌ها ارﺗﺒﺎط داشته باشد. با توجه به مزیت های پروتئین های کایمر، CTXB-TCPA می تواند جایگزین مناسبی برای مخلوط پروتئین ها جهت تحریک سیستم ایمنی باشد.
     
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: میکروبیولوژی

ارسال پیام به نویسنده مسئول


کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله علوم پزشکی رازی می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2015 All Rights Reserved | Razi Journal of Medical Sciences

Designed & Developed by : Yektaweb